Главная


Бласттрансформация

Наиболее известный способ идентификации активированных клеток заключается в определении у этих клеток под световым микроскопом морфологических изменений, называемых бласттрансформацией.

В Т- и В-лимфоцитах, находящихся в фазе Gx, между 12 и 24 ч начинает увеличиваться масса как ядра, так и цитоплазмы, появляется крупное ядрышко и наблюдается фрагментация эухроматина. При этом, как видно в электронный микроскоп, эндоплазматический ретикулум, полирибосомы и аппарат Гольджи находятся в цитоплазме. Количество таких клеток (бластов) можно определить с помощью гемоцитометра, идентифицируя их по наличию морфологических особенностей или с помощью электронных счетчиков клеток, исходя из объема клеток (объем бласта в 3—30 раз больше, чем объем «покоящейся» клетки). Основным изменением в структуре ядра оказывается увеличение объема межхроматинового вещества, обусловленное накоплением новосинтезированных белков, в том числе сократительных, например актина. В связи с этим циклогексимид, ингибитор синтеза белка, способен также предотвращать и бласттрансформацию. Хотя бласттрансформация часто предшествует синтезу ДНК, это происходит не всегда. Например, некоторые антисыворотки против мю- и дельта-цепи могут индуцировать бласттрансформацию у В-клеток мыши, однако синтез ДНК в этих клетках начинается лишь при наличии факторов роста, продуцируемых Т-клетками. Ни один митоген не стимулирует все клетки. Даже при стимуляции тимоцитов или очищенных Т-клеток с помощью ФГА очень редко вступают в клеточный цикл более 50% всех клеток, а при использовании других митогенов это значение обычно лежит между 10 и 25%, тогда как в нестимулированных популяциях имеется лишь < 3% бластов.