Главная


Радиоавтография, иммунофлюоресценция

Радиоавтография представляет собой более чувствительный, чем окрашивание, метод исследования связывающей способности веществ и их подвижности в геле. Чистые антигены метят 131I, 82Вr, 59Fe, вносят их в смесь антигенов. После преципитации высушенные пластины с гелем накладывают на куски рентгеновской пленки и оставляют их на несколько дней или недель. Радиоактивные преципитаты вызывают потемнение соответствующих участков пленки. Определение железосвязывающих трансферринов, например, оказывается довольно простой процедурой — к смеси антигенов перед анализом добавляют небольшое количество 59Fe. После высыхания пластины с гелем накладывают на рентгеновскую пленку; полосы трансферрина становятся хорошо различимыми на пленке. При помощи радиоактивных изотопов можно исследовать связывание витаминов, гормонов и некоторых лекарственных препаратов с сывороточными белками. Если антигены или антитела маркировать флюоресцирующими веществами, например, флюоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ), то образующиеся иммунные преципитаты также будут флюоресцировать. Это позволяет проводить анализ в УФ лучах. Перед исследованием препаратов в УФ свете необходимо удалить избыток флюоресцирующего красителя из изучаемого препарата с помощью диализа или гель-фильтрации.