Главная

• Антитела
• Реакция антиген-антитело
• Клетки иммунной системы
• История иммунологии
• Иммунохимия
• Продукты на страже иммунитета
• Вакцины
• Общие и частные проблемы иммунологии
• Основы иммунологии

Встречный электрофорез. Оценка метода

Оценка метода обнаружения HB_sAg. ВИЭФ представляет собой аналитический метод второго поколения и по сравнению с двойной ИД по Ухтерлони (первое поколение) имеет следующие преимущества:

1. Чувствительность ВИЭФ в 10 раз выше, могут быть использованы антигены, выявление которых методами диффузии не оправдывает себя.

2. Результаты можно учитывать через 1 ч, максимум через 3 ч, тогда как для полноценной диффузии необходимо не менее 24 ч.

Попытки усовершенствования методики привели к разработке специальных модификаций для обнаружения HB_sAg. Упрощение методики достигается использованием ацетат-целлюлозной мембраны, длительность процесса сокращается применением высоковольтного электрофореза. Все же микромодификации не способны повысить чувствительность метода. ВИЭФ высокоспецифичен при поиске HB_sAg, но он уступает чувствительности методам третьего поколения, РИА, иммунофлюоресцентный анализ (ИФА). Методы третьего поколения относительно дороги, поэтому ВИЭФ имеет преимущество перед ними при массовых обследованиях.

Оценка метода обнаружения АПФ. Чувствительность метода двойной диффузии при определении АФП составляет около 10 мг вещества на 1 л сыворотки. Применение ВИЭФ позволяет повысить чувствительность в 1,5—3 раза, т. е. до 3,6 мг/л. Небольшое повышение чувствительности достигается окраской нигрозином или применением флюоресцирующих антител. Положительная реакция на АФП позволяет предположить наличие первичного рака печени или злокачественной тератобластомы. Ложноположительные результаты определения АФП при помощи ВИЭФ наблюдаются примерно в 3 случаях из 100. Отрицательные результаты ввиду относительно малой чувствительности ВИЭФ не позволяют исключить диагноз рака печени. Более чувствительные методы, такие как пассивная гемагглютинация и радиоиммунологический анализ могут обнаруживать повышение АФП в крови и при других раковых заболеваниях, причем необязательно при метастазированиив печень. Поэтому только неуклонное повышение уровня АФП в течение всего периода наблюдения типично для начинающегося рака печени. Для более точного контроля рекомендуется применять количественные методы Манчини и Лорелла.