Активация лимфоцитов под воздействием ФГА послужила в 1960 г. толчком для
разработки метода бласттрансформации, при помощи которого многочисленные
исследователи оценивают in vitro клеточный иммунитет, в том числе реакции
В-клеток. Методическая сложность реакции бласттрансформации лимфоцитов породила самые разнообразные модификации,
которые в свою очередь затрудняют интерпретацию результатов, полученных разными
исследователями. Контакт лимфоцитов, несущих соответствующий рецептор с
антигеном или митогеном, вызывает так называемую реакцию бласттрансформации. В
соответствии с различными биологическими процессами, протекающими в
трансформированных клетках, известно много физико-химических и биологических
методов. Рекомендуется использовать вариант реакции бласттрансформации
лимфоцитов, основанный на включении
меченного тимидина. Измерение основано на вторичном вовлечении
первично-неактивированных лимфоцитов в реакцию вследствие продукции митогенных
факторов (интерлейкины). Этим объясняется причина продолжительного времени
культивирования (ожидание эффекта усиления). Тест позволяет исследовать 6
основных моментов:
— определение специфической сенсибилизации пациентов к чужеродным
антигенам или
аутоантигенам, соответствующий антиген исследуют in vitro;
— вследствие внесения митогенов in vitro клетки подвергаются
неспецифической стимуляции; известно довольно много селективно действующих
Т- или В-митогенов; митогены доказывают способность лимфоцитов к стимуляции;
до настоящего времени не ясно, какие субпопуляции стимулируются теми или
иными митогенами;
— обычная реактивность лимфоцитов может изменяться под воздействием
внешних факторов (условия культивирования или добавки);
— если к моменту отбора пробы крови иммунная система испытывает нагрузки
(инфекция, отторжение трансплантата), то большое число лимфоцитов
оказываются реактивными, т. е., помимо прочего, способными к
бласттрансформации in vivo. Если провести немедленное мечение клеток,
отмечается повышенное включение метки в лимфоциты. Этот феномен не только
указывает на острый процесс, но также может существенно искажать результаты
некоторых тестов;
— пролиферативный ответ на активаторы лимфоцитов можно использовать в
качестве индикаторной системы для изучения регуляции иммунитета. Для этого
можно осуществлять совместное культивирование в аутологичных и аллогенных
системах. В последнем случае исследуемая популяция клеток рассматривается
как индикаторная (респондеры) или как модулирующая (реактанты);
— определение первичной реакции на аллогенные клетки в форме СКЛ (см.
раздел «Смешанная культура лимфоцитов»).
