Главная


Метод E-розеток. Общая оценка метода

Метод Е-розеток сравнительно прост, но ввиду плохой воспроизводимости трудно поддается стандартизации. Это создает трудности при сравнении результатов, полученных разными группами исследователей. Добавление сыворотки эмбрионов коров или человеческий сывороточный альбумин стабилизирует розетки и повышает их выход. Оптимальное соотношение лимфоцитов и ЭБ колеблется от 1 : 10 и 1 : 50. Автологичные эритроциты тормозят розеткообразование. Подсчет «немедленных» розеток (сразу после центрифугирования) практикуется очень редко. Фактором, определяющим успех метода, является щадящее ресуспендирование.

Т-клетки можно определять с высокой корреляций относительно метода Е-розеток путем подсчета АНАЭ (α-нафтилацетатэстераза-позитивных клеток). Количество АНАЭ-позитивных клеток коррелирует с Тμ,-, β-глюкуронидаза-позитивными и Тγ-клетками. При помощи моноклональных антител можно селективно блокировать рецептор ЭБ. Этот рецептор встречается только у Т-клеток. У 30% фетальных тимоцитов одновременно обнаруживают рецепторы ЭБ и комплемента. Некоторые Другие клетки (гепатоциты, клетки опухолей, фибробласты и др.) также образуют розетки с ЭБ. Гепатоциты дают до 90— 100% Е-розеток. Вероятно, феномен образования Е-розеток обусловлен наличием определенных компонентов мембран, отсутствующих у В-клеток. В-клетки образуют розетки с эритроцитами мыши; ДЭАЭ-декстран усиливает розеткообразование. Использование КонА (10 мкг/мл) дает максимум РОК через 48 часа. Можно автоматизировать подсчет РОК. Ввиду простоты и широты применения метод Е-розеток следует рассматривать как стандартный метод.